样品的采集与贮存（二） 集贮加入60mL～100mL提取剂

2、样品超声波提取

本法适用于从土壤中提取非挥发或半挥发有机物，集贮超声波的样品作用是使样品分散并保证了样品基休与提取剂之间充分地接触。

准确称取一定量待测土样(或取30.0g鲜土样加30 g～60g无水Na₂SO₄混匀)置于400mL烧杯中，集贮加入60mL～100mL提取剂，样品超声振荡3 min～5 min，集贮真空过滤或离心分出提取液，样品固体物再用提取剂提取2次，集贮分出提取液合井，样品待净化。集贮

3、样品索氏提取

本法适用于从土壤中提取非挥发及半挥发有机污染物。集贮

准确称取一定是样品待测土样或取鲜土样20.0g加入等量无水Na₂SO₄研磨均匀。转入滤纸筒中，集贮再将滤纸筒里于索氏提取器，样品在有1粒～2粒干净沸石的150mL圈底烧瓶中加100mL提取剂，联接索氏提取器，加热回流16至24 h即可。

此法为经典提取法，又称完全提取法，提取效果好，但需时间长，且干扰物较多。可将合适的吸附剂与样品混匀一起置入滤纸筒进行回流，可起到减少干扰物的作用。

4、浸泡回流法

对于一些与土壤作用不大且不易挥发的有机物可用此法进行提取。

5、其它方法

近年来，吹扫蒸馏法(用于提取易挥发性有机物)、超临界流体提取法(SFE)都发展很快。

尤其是SFE法由于其快速、高效、安全性(不需任何有机溶剂)，因而是具有很好发展前途的提取法。

四、提取液的净化

使待测组分与干扰物分离的过程为净化。当用有机溶剂提取样品时，一些干扰杂质可能与待测物一道被提取出，这些杂质若不除掉将会影响检测结果，甚至使定性定量无法进行，严重时还可使气相色谱的柱效恶化、检定器沾污，因而提取液必须经过净化处理。净化的原则是尽最完全除掉干扰物，而又使待测物尽量少损失。常用的净化方法为:

1、液-液分配法

液-液分配的基本原理是在一组互不相溶的溶剂对中溶解某一溶质成分，该溶质以一定的比例分配(溶解)在溶剂的两相中。通常把溶质在两相溶剂中的分配比称为分配系数。在同一组溶剂对中，不同的物质有不同的分配系数，在不同的溶剂对中，同一物质也有着不同的分配系数。利用物质和溶剂对之间存在的分配关系，选用适当的溶剂通过反复多次分配，便可使不同的物质分离，从而达到净化的目的，这就是液一液分配净化法。采用此法进行净化时一般可得较好的回收率，不过分配的次数须是多次方可完成。

液-液分配过程中若出现乳化现象，可采用如下方法进行破乳:①加入饱和硫酸钠水溶液，以其盐析作用而破乳:②加入1∶1的硫酸水液，加入且从10mL逐步增加，直至消除乳化层，此法只适于对酸德定的化合物;③离心机离心分离。

液-液分配中常用的溶剂对有:乙肺-正巳烷;N,N-二甲基甲酰胺(DMF )-正巳烷，二甲亚矾-正巳烷;丙酮-正巳烷；丙酮-二氯甲烷。通常情况下正巳烷可用廉价的石油醚(60^oC～90℃)代替。

2、化学处理法

用化学处理法净化，能有效地去除脂肪、色素等杂质。常用的化学处理法有酸处理法和碱处理法。

1、酸处理法

用浓硫酸或1:1浓硫酸:发烟硫酸直接与提取液(酸与提取液体积比1:10)在分液漏斗中振荡进行成化，以除掉脂肪、色素等杂质.其净化原理是脂肪、色素中含有碳一碳双键，如脂肪中不饱合脂肪酸和叶绿素中含一双键的叶绿醇等，这些双键与浓硫酸作用时产生加成反应，所得的磺化产物溶于硫酸，这样便使杂质与待测物分离。

这种方法常用于强酸条件下稳定的有机物如有机氯农药的净化，而对于易分解的有机磷、氨基甲酸酯农药则不可使用。

2、碱处理法

一些耐碱的有机物如农药艾氏剂、狄异剂、异狄氏剂可采用氢氧化钾一助滤剂柱代替皂化法。提取液经浓缩后过柱净化，用石油醚洗脱，有很好的回收率。

3、吸附柱层析法

吸附柱层析法的原理，就是提取液中各组分在柱中吸附剂上反复被吸附与解吸，并通过洗脱溶剂的解吸作用使待测物与杂质分离，达到净化目的。

在玻璃柱中装入一种或数种吸附剂(吸附剂顶置1cm～2cm厚的无水硫酸钠)，使待测物的提取液(为避免扩散，提取液应浓缩到2 mL左右》过往。由于吸附剂对待测物和干扰物的吸附性不同，当用洗脱剂(一种或数种极性不同的溶剂配成)淋洗时，若柱中的吸附剂对待测物吸附性强时，则杂质被淋出，柱中的待测物另选洗脱剂即可淋出，反之则待测物被淋出。这种方法是常用的净化法之一。常用的吸附剂有:弗罗里硅土(Florisil)又称硅镁型吸附剂、氧化铝〔包括中性、酸性和碱性AL₂O₃)、硅胶、硅藻土和活性炭等。

1、氧化铝柱

氧化侣为一种高度多孔的粒状物，可从不同化学极性干扰物中将待测物分离出来。

碱性(B)氧化铝, pH9～pH10，用于碱性和中性化合物的分离，对于碱、醇类、烃类、生物碱，甾体化合物等是稳定的。缺点是可引起聚合、缩合和脱水反应，并不能以丙酮或乙酸乙酯作为洗脱剂。

中性(N)氧化铝，适于绝大多数有机物的净化如:醛类、酮类、醌类、酯类、内酯类等。其缺点是比碱性氧化铝活性小很多。酸性〔A)氧化铝,pH4～pH5，主要用于酸性有机物的分离。

市售氧化铝须经活化后方能使用(于400^oC～450^oC灼烧3h～4 h,待冷至常温后，储存在干燥器中备用)。由于氧化铝的活性要比其它吸附剂如弗罗里硅土大得多，有机物在柱中不易被洗出，而用强极性溶剂淋洗时，又易使杂质与被测物一井洗出，所以必要时还应对氧化铝进行降活处理，即在已活化过的氧化铝中加入3%～15%的水，便成为不同级别活性的氧化铝(如下表)：

2、弗罗里硅土柱

Florisil是Floridin公司注册的商品名，是一种带酸性的硅酸镁。该吸附剂具有很大的表面积，比表面高达297m²·kg^-1,因为它是一种合成材料，所以不同批次产品活性差异很大，通过活化可部分消除这种差异。

目前弗罗里硅土在国内外广泛用于酞酸酯类、亚硝胺类、硝基芳香化合物、卤代醚类、氯代烃类、有机磷及有机氯农药的净化。

市售弗罗里硅土应在600^oC ～650℃下活化3h,待冷至室温后贮存于带磨口玻璃塞或衬铝箔螺旋盖的玻璃容器中避光保存。

当用弗罗里硅土净化邻笨二甲酸酯(又称酞酸酯)类增塑剂时，需要将上述弗罗里硅土脱活:取1008弗罗里硅土置于500mL烧杯中，在40^oC下加热16 h，转至500 mL试剂瓶中，密封。冷至室温，加试剂水3 mL转动10 min以充分混合，密封瓶口放置2h。即可用于净化酞酸酯。

当弗罗里硅土用于净化亚硝胺、有机氯农药、多氯联苯、有机磷农药等时，使用前还需将已活化的弗罗里硅土在130^oC烘制2h，才可用于净化以确保分离效果。

参考资料：土壤农业化学分析方法

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